Bakteri amilolitik merupakan bakteri penghasil enzim  amilase yang mampu menghidrolisis amilum. Secara alami bakteri ini tumbuh pada limbah rumah tangga, karena limbah yang dihasilkan mengandung amilum yang berasal dari buah-buahan dan sisa-sisa makanan. Penelitian ini bertujuan untuk memperoleh isolat bakteri amilolitik dari limbah rumah tangga. Isolasi bakteri dilakukan dengan menggunakan medium NA, untuk mengetahui keberadaan bakteri amilolitik dilaku uji hidrolisis amilum , karaterisasi dan identifikasi dilakukan dengan cat gram, uji morfologi dan fisiologis serta fermentasi gula. Hasil isolasi dari 2 sampel limbah diperoleh 20 isolat bakteri, pengujian kemampuan amilolitik diperoleh 6 isolat. Dari 6 isolat dua isolat dengan zona bening tertinggi di karakterisasi dan diidentifikasi dengan menggunakan Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology. Hasil penelitian  menunjukkan isolat LB3 merupakan bakteri gram negatif, mampu memfermentasi gula dan berkerabat dengan genus Alcaligenes sedangkatn LRT3 bakteri gram positif, mampu memfermentasi gula dan berkerabat dengan genus Bacillus.